醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)——執(zhí)業(yè)藥師考試輔導(dǎo)系列談之《中藥化學(xué)》輔導(dǎo)：色譜法的應(yīng)用
1、分配柱色譜：載體主要有硅膠、硅藻土及纖維素粉等。
分離水溶性或極性較大的成分如生物堿、苷類、糖類、有機(jī)酸等化合物時(shí)，固定相多采用強(qiáng)極性溶劑，如水、緩沖溶液 等，流動(dòng)相則用氯仿、乙酸乙酯、丁醇等弱極性有機(jī)溶劑，稱之為正相色譜：
分離脂溶性化合物，如高級(jí)脂肪酸、油脂、游離甾體等時(shí)，固定相可用石蠟油，流動(dòng)相 用水或甲醇等強(qiáng)極性溶劑，稱為反相分配色譜。
2、吸附色譜法應(yīng)用
（1）硅膠、氧化鋁吸附柱色譜過程中，吸附劑的用量一般為樣品量的30-60倍。樣品極性較小、難以分離者，吸附劑用量可適當(dāng)提高至樣品量的100-200倍。
（2）硅膠、氧化鋁吸附柱色譜，應(yīng)盡可能選用極性小的溶劑裝柱和溶解樣品，以利于樣品在吸附劑柱上形成狹窄的原始譜帶。
（3）洗脫所用溶劑的極性宜逐步增加。
（4）為避免發(fā)生化學(xué)吸附，酸性物質(zhì)宜用硅膠，堿性物質(zhì)則宜用氧化鋁進(jìn)行分離。
3、聚酰胺吸附色譜法
聚酰胺（polyamide）吸附屬于氫鍵吸附，特別適合分離酚類、醌類、黃酮類化合物。
（1）聚酰胺的性質(zhì)及吸附原理
酰胺羰基與酚類、黃酮類化合物的酚羥基，或酰胺鍵上的游離氨基與醌類、脂肪羧酸上的羰基形成氫鍵締合而產(chǎn)生吸附。醫(yī) 學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)吸附強(qiáng)弱則取決于各種化合物與之形成氫鍵締合的能力。
① 形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目越多，吸附能力越強(qiáng)。
② 成鍵位置對(duì)吸附力也有影響。易形成分于內(nèi)氫鍵者，其在聚酰胺上的吸附相對(duì)減弱。
③ 分子中芳香化程度高者，則吸附性增強(qiáng)；反之，則減弱。
一般情況下，各種溶劑在聚酸胺柱上的洗脫能力由弱至強(qiáng)，可大致排列成下列順序；水→甲醇→丙酮→氫氧化鈉水溶液→甲酰胺→二甲基甲酰胺→尿素水溶液
（2）聚酰胺色譜的應(yīng)用
聚酰胺對(duì)一般酚類、黃酮類化合物的吸附是可逆的（鞣質(zhì)例外），特別適用于該類化合物的制備分離，醫(yī)學(xué)教育 網(wǎng)原創(chuàng)可用于植物粗提物的脫鞣質(zhì)。此外，對(duì)生物堿、萜類、甾體、糖類、氨基酸等極性與非極性化合物也有著廣泛的用途。
4、大孔吸附樹脂
（1）大孔吸附樹脂的吸附原理：大孔吸附樹脂是吸附性和分子篩性原理相結(jié)合的分子材料。吸附性是由于范德華引力或產(chǎn)生氫鍵的結(jié)果，分子篩性是由于其本身多孔性結(jié)構(gòu)所決定的。
（2）影響吸附的因素：大孔吸附樹脂本身的性質(zhì)、溶劑的性質(zhì)和化合物的性質(zhì)是影響吸附的3個(gè)重要因素。
（3）大孔吸附樹脂的應(yīng)用：苷與糖類的分離，生物堿的精制，多糖、黃酮、三萜類化合物的分離。
（4）洗脫液的選擇：洗脫液可使用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。
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1、分配柱色譜：載體主要有硅膠、硅藻土及纖維素粉等。
分離水溶性或極性較大的成分如生物堿、苷類、糖類、有機(jī)酸等化合物時(shí)，固定相多采用強(qiáng)極性溶劑，如水、緩沖溶液 等，流動(dòng)相則用氯仿、乙酸乙酯、丁醇等弱極性有機(jī)溶劑，稱之為正相色譜：
分離脂溶性化合物，如高級(jí)脂肪酸、油脂、游離甾體等時(shí)，固定相可用石蠟油，流動(dòng)相 用水或甲醇等強(qiáng)極性溶劑，稱為反相分配色譜。
2、吸附色譜法應(yīng)用
（1）硅膠、氧化鋁吸附柱色譜過程中，吸附劑的用量一般為樣品量的30-60倍。樣品極性較小、難以分離者，吸附劑用量可適當(dāng)提高至樣品量的100-200倍。
（2）硅膠、氧化鋁吸附柱色譜，應(yīng)盡可能選用極性小的溶劑裝柱和溶解樣品，以利于樣品在吸附劑柱上形成狹窄的原始譜帶。
（3）洗脫所用溶劑的極性宜逐步增加。
（4）為避免發(fā)生化學(xué)吸附，酸性物質(zhì)宜用硅膠，堿性物質(zhì)則宜用氧化鋁進(jìn)行分離。
3、聚酰胺吸附色譜法
聚酰胺（polyamide）吸附屬于氫鍵吸附，特別適合分離酚類、醌類、黃酮類化合物。
（1）聚酰胺的性質(zhì)及吸附原理
酰胺羰基與酚類、黃酮類化合物的酚羥基，或酰胺鍵上的游離氨基與醌類、脂肪羧酸上的羰基形成氫鍵締合而產(chǎn)生吸附。醫(yī) 學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)吸附強(qiáng)弱則取決于各種化合物與之形成氫鍵締合的能力。
① 形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目越多，吸附能力越強(qiáng)。
② 成鍵位置對(duì)吸附力也有影響。易形成分于內(nèi)氫鍵者，其在聚酰胺上的吸附相對(duì)減弱。
③ 分子中芳香化程度高者，則吸附性增強(qiáng)；反之，則減弱。
一般情況下，各種溶劑在聚酸胺柱上的洗脫能力由弱至強(qiáng)，可大致排列成下列順序；水→甲醇→丙酮→氫氧化鈉水溶液→甲酰胺→二甲基甲酰胺→尿素水溶液
（2）聚酰胺色譜的應(yīng)用
聚酰胺對(duì)一般酚類、黃酮類化合物的吸附是可逆的（鞣質(zhì)例外），特別適用于該類化合物的制備分離，醫(yī)學(xué)教育 網(wǎng)原創(chuàng)可用于植物粗提物的脫鞣質(zhì)。此外，對(duì)生物堿、萜類、甾體、糖類、氨基酸等極性與非極性化合物也有著廣泛的用途。
4、大孔吸附樹脂
（1）大孔吸附樹脂的吸附原理：大孔吸附樹脂是吸附性和分子篩性原理相結(jié)合的分子材料。吸附性是由于范德華引力或產(chǎn)生氫鍵的結(jié)果，分子篩性是由于其本身多孔性結(jié)構(gòu)所決定的。
（2）影響吸附的因素：大孔吸附樹脂本身的性質(zhì)、溶劑的性質(zhì)和化合物的性質(zhì)是影響吸附的3個(gè)重要因素。
（3）大孔吸附樹脂的應(yīng)用：苷與糖類的分離，生物堿的精制，多糖、黃酮、三萜類化合物的分離。
（4）洗脫液的選擇：洗脫液可使用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。
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